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細胞培養(yǎng)常見的問題怎么決絕

2021-12-30 [2329]

細胞培養(yǎng)時,培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么?丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝丙酮酸鈉。


倒置相差顯微鏡

倒置顯微鏡一般構造與普通顯微鏡一樣有物鏡目鏡光源光路系統(tǒng)等。但倒置顯微鏡的光源位于在載物臺上放,光線由上至下照射到觀察物上,物鏡則位于載物臺下方,觀察培養(yǎng)細胞多用放大倍數(shù)為 10×和 20×的物鏡,目鏡為 10×。


擦拭鏡頭可用沾酒精/乙混合液或二甲苯的鏡頭紙或脫脂棉。


擦拭涂漆表面,可用紗布除去灰塵。若有油漬污垢,用紗布沾少許汽油去除,不能用有機溶劑(如:酒精乙和其它稀釋劑)擦拭涂漆表面和塑料部件。


儀器不使用時,用有機玻璃或聚乙烯罩上,并存放于干燥且沒有霉菌滋生的地方。


物鏡和目鏡放在有干燥劑的密閉容器中。

細胞


需要注意:


1、-80度凍存細胞的時間太長,一般如果需要長期保存的話,超過一個月。轉入液氮。原有的凍存細胞狀態(tài)就不好,表現(xiàn)為細胞活力不夠,細胞密度不高。

換液太快,培養(yǎng)體系太大,如果細胞狀態(tài)不好,保持較小的培養(yǎng)容積,以獲得較高的細胞密度。如果培養(yǎng)基還是桃紅色,說明細胞的代謝活動很弱,此時不宜換液。不知道你這個細胞是喜歡聚集生長還是離散生長。

根據(jù)條件調節(jié)。比如,如果喜歡聚堆長,建議先傾斜培養(yǎng)瓶/皿,2h為一個時間間隔,觀察細胞狀態(tài),以作調整。


2、如果當天能見到貼壁的話,說明還是可以的.有時候培養(yǎng)基顏色偏紫,細胞貼壁會有問題的.你核實一下你培養(yǎng)基顏色是否偏堿.如果偏堿,可以適當調高培養(yǎng)箱二氧化碳的濃度.或者換新的培養(yǎng)基.特別是開啟過的培養(yǎng)基,適用時間長容易出現(xiàn)這個問題。


3、細胞凍存過程如果出了問題,復蘇細胞溶解要迅速,有時候水浴鍋刀38度,甚至40度,目的是讓其快速解凍,而且復蘇一次的培液血清濃度可以相對高一點,等第二次換液時換回10%。

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